培養(yǎng)基的配制

  1、將用于配制培養(yǎng)基的容器洗凈，加入培養(yǎng)基總量四分之三的蒸餾水，放入所需的瓊脂和糖，然后加熱溶解。在加熱過程中應(yīng)不斷地攪拌，以避免瓊脂粘鍋或溢出。

  2、待瓊脂和糖完全溶解后，按順序加入各貯備液以及所需的植物激素。

  3、用蒸餾水定容補充由于加熱蒸發(fā)所損失的體積。

  4、用蒸餾水調(diào)整pH。

  5、通過漏斗或下口杯將培養(yǎng)基注入組組織培養(yǎng)容器內(nèi)，注入量為瓶容積的十分之一左右。灌裝要迅速，盡可能避免培養(yǎng)基粘在瓶壁上，且應(yīng)在培養(yǎng)基未冷卻之前灌裝完畢。

  6、用封口膜或含透氣膜的塑料蓋將瓶口或試管口封嚴(yán)。

  7、將封裝好的組織培養(yǎng)容器碼放在高壓滅菌鍋內(nèi)。于105Pa壓力、121℃下滅菌20分鐘。如使用小型手提式滅菌鍋時，一定要注意，當(dāng)鍋內(nèi)壓力上升時，先反復(fù)放氣數(shù)次，將鍋內(nèi)空氣排盡以后，再計算時間，否則達不到高壓滅菌的效果。

  8、對于一些受熱易于分解的物質(zhì)，如維生素類，可采取先過濾滅菌的方法。待培養(yǎng)基滅菌后，尚未冷卻之前(40℃左右)加入并搖勻。經(jīng)過高壓滅菌的培養(yǎng)基可在室溫下存放3-5天，或在冷藏箱內(nèi)存放10天左右，建議在短時間內(nèi)用完。