圖1 初代培養(yǎng)基1處理的莖段腋芽經(jīng)誘導(dǎo)形成莖蔓

不同初代培養(yǎng)基處理下的莖段腋芽誘導(dǎo)率不同。IAA濃度為0.2 mg/L的初代培養(yǎng)基處理下，莖段腋芽誘導(dǎo)率均高于0.5 mg/L IAA濃度處理;初代培養(yǎng)基2處理下的腋芽誘導(dǎo)率高(99%)，生長速度快;初代培養(yǎng)基4處理下腋芽誘導(dǎo)率低(67%)，生長速度慢(圖2)。

圖2 不同初代培養(yǎng)基莖段腋芽誘導(dǎo)率

2.2 不同繼代培養(yǎng)基處理對莖蔓生長的影響

將初代一葉莖蔓或多葉莖蔓轉(zhuǎn)入不同繼代培養(yǎng)基中，發(fā)現(xiàn)莖蔓長勢緩慢甚至停滯，即使誘導(dǎo)出新的帶葉莖蔓，莖節(jié)短，葉片呈現(xiàn)黃色、直徑小。莖段下部膨大部位變粗變白趨勢與初代培養(yǎng)莖段相比明顯減小，部分莖蔓變黃枯萎。故不同繼代培養(yǎng)基下的繼代培養(yǎng)苗均無法獲得。

2.3 不同生根培養(yǎng)基處理對莖蔓生長的影響

因初代培養(yǎng)的莖段在繼代培養(yǎng)基下無法獲得繼代莖蔓，本試驗將4～6節(jié)帶葉莖蔓的初代培養(yǎng)苗直接轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基(圖3 A)。不同生根培養(yǎng)基處理下生根前莖蔓均生長緩慢，后下端顏色逐漸變深，1周后開始長出3～5條短根(圖3 B);3周后主根上生長出側(cè)根，莖蔓生長變快(圖3 C);4周后組培苗變?yōu)樯罹G色，根部發(fā)達，長勢強勁(圖3 D)。生根培養(yǎng)基1—6處理下的莖段生根率分別為81%、85%、88%、88%、87%、89%。

圖3 不同生根培養(yǎng)基處理莖蔓生長狀況

不同生根培養(yǎng)基處理對根的影響不同。莖蔓下端誘導(dǎo)生根第22 d時，隨著不同生根培養(yǎng)基處理中IBA濃度的增加，根的直徑變大(生根培養(yǎng)基1—6處理下分別為0.10、0.15、0.20、0.23、0.30、0.31 cm)，平均側(cè)根數(shù)減少(生根培養(yǎng)基1—6處理下分別為4、5、8、2、1、0個)。其中生根培養(yǎng)基3(IBA濃度為0.5 mg/L)處理的根長勢快、直徑適中，側(cè)根數(shù)目多，且幼苗長勢相較于其他培養(yǎng)基植株快(圖4)。

2.4 煉苗與移栽方式對組培苗成活率的影響

煉苗可以使植株定植后迅速適應(yīng)大田環(huán)境，縮短緩苗時間，增強對不良環(huán)境的抵抗能力。這對組培苗尤為重要，組培苗在培養(yǎng)期間環(huán)境濕度大，如果直接將其移栽至大田中植株會因失水而迅速死亡。

將生根組培苗從組培瓶中小心取出，洗去培養(yǎng)基，移栽至滅菌的基質(zhì)中進行煉苗，無菌苗易感染雜菌，因此移栽后淋透1 000倍多菌靈溶液有助于幼苗生長。此時幼苗密度可適量增加(每平方米100株)。

待吊瓜苗1個月后長至8～13節(jié)，主莖2～3 mm，葉片直徑5～9 cm，新根增加，葉片形成蠟質(zhì)層(圖5 A)時，將其小心移栽至單盆中，也可以直接將幼苗移栽至大田中，移栽過程中避免損傷根部(圖5 B)。經(jīng)過煉苗移栽后幼苗成活率可達90%以上。

圖4 不同生根培養(yǎng)基處理對根的影響

圖5 組培苗煉苗與移栽時的生長狀

3 討論與結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，利用“越蔞2號”吊瓜初代離體莖段經(jīng)不同初代培養(yǎng)基誘導(dǎo)可獲得莖蔓，其中6-BA與IAA濃度為0.5 mg/L和0.2 mg/L組合時，誘導(dǎo)率高，為99%，此時莖蔓性狀良好、長勢旺盛。初代培養(yǎng)的莖蔓轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基后誘導(dǎo)率低，生長緩慢甚至死亡。植物激素與營養(yǎng)物質(zhì)是植物生長所必需的，初代培養(yǎng)苗主莖纖細，本身營養(yǎng)物質(zhì)少，對培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)吸收率低，只能依賴激素刺激生長，而繼代培養(yǎng)后其本身的生命活力受限不能獲得誘導(dǎo)苗。因此我們直接用初代培養(yǎng)獲得的莖蔓進行誘導(dǎo)生根。

植物生長調(diào)節(jié)劑IBA通常用來促進組織生根，但過量使用非但不利于側(cè)根的形成而且易造成根部變粗畸化。本試驗中IBA濃度為0.5 mg/L時吊瓜根的長勢快，根直徑適中，側(cè)根數(shù)目多，且幼苗長勢相較于其他培養(yǎng)基植株快。而去除繼代培養(yǎng)這一環(huán)節(jié)，直接利用腋芽誘導(dǎo)莖蔓后進行生根誘導(dǎo)，大大提高了成苗率。

本試驗煉苗移栽方式可使吊瓜組培苗成活率達90%以上。隨著吊瓜市場的興起，高品質(zhì)的吊瓜苗供不應(yīng)求。本試驗極大地克服了利用莖尖培養(yǎng)脫毒苗出苗率低的技術(shù)限制，并且利用初代脫毒苗進行誘導(dǎo)，大大降低吊瓜病毒感染率，使組培苗的果實品質(zhì)得到保障，為建立品質(zhì)優(yōu)良的吊瓜組培苗繁育體系奠定了基礎(chǔ)。