櫻桃組培快繁試驗

  組織培養(yǎng)技術(shù)通過莖尖外植體進(jìn)行櫻桃組培繁殖，可達(dá)到快速繁殖苗木和脫去病毒病的效果。以甜櫻桃品種高砂、頑童和中國櫻桃品種萊陽矮櫻為試材，以MS與F14為基本培養(yǎng)基進(jìn)行組織培養(yǎng)試驗。對增殖率和成苗率等指標(biāo)進(jìn)行研究。

  材料

  試材為甜櫻桃品種高砂、頑童.中國櫻桃品種萊陽矮櫻。

  方法

  F14和Ms為基本培養(yǎng)基;

  F14+蔗糖30 L+瓊脂7 L為分化培養(yǎng)基;

  F14+植物生長調(diào)節(jié)劑為增殖培養(yǎng)基，添加的植物生長調(diào)節(jié)劑有6—芐基氨基嘌吟(6. BA)、赤霉素(GA )和吲 哚丁酸(IBA);

  F14+IBA和MS+IBA為生根培養(yǎng)基。

  F14+IBA 1. 0mg/L為一步生根法培養(yǎng)基。

  F14+IBA 1. 0mg/L+活性炭為試驗活性炭作用的培養(yǎng)基。

  培養(yǎng)基的pH值為5. 6-5. 8, 分裝在100m 1三角瓶中，在121C下滅菌20分鐘，在黑暗條件下保存?zhèn)溆谩?

  試材的預(yù)處理

  取櫻桃芽露綠的一年生成熟枝條，剪成帶一個芽、長約2cm的枝段，用刀將芽從枝段上削下來(帶 些木質(zhì)部)，剝除芽鱗片，去除莖表皮，用洗潔精浸泡3分鐘，在流水中沖洗60-90分鐘，在超凈 工作臺上用70%酒精消毒30秒鐘，用無菌水沖洗3次(每次1?2分鐘)，再用0. 1%氯化汞消毒15 分鐘，置無菌水中浸泡20分鐘，用無菌水沖洗4次，待接種。

  試材的接種培養(yǎng)

  在超凈工作臺上將經(jīng)預(yù)處理的試材用鑷子剝除芽外部的葉原基，去除木質(zhì)部，切下1mm大小的莖 尖，接種于分化培養(yǎng)基F14+蔗糖30 L+瓊脂7 L上培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度25±2cC,光強(qiáng)2000-2500K. 每天光照l6小時。

  評價指標(biāo)

  微莖尖成苗數(shù)=萌發(fā)后能正常增殖繼代、具有成苗能力的微莖尖數(shù)。

  成苗率(%)=成苗微莖尖數(shù)/接種微莖尖數(shù)X100

  增殖芽數(shù)=接種1個芽25天后增殖的所有芽數(shù)

  增殖系數(shù)=轉(zhuǎn)接后芽數(shù)/轉(zhuǎn)接前芽數(shù)

  生根率(%)=生根嫩梢數(shù)/接種嫩梢數(shù)X100

  結(jié)果與分析

  不同櫻桃品種間莖尖組培成苗率的差異

  在F14基本培養(yǎng)基上，接種甜櫻桃品種高砂、頑童和中國櫻桃萊陽矮櫻的莖尖，高砂的成苗率為 23. 3%,頑童16. 7%,萊陽矮櫻83. 3% 。在組培中發(fā)現(xiàn)，甜櫻桃萌發(fā)率較低，接種后的第2天傷口處及莖尖邊緣褐變，之后有的莖尖周圍發(fā)生大量愈傷組織，延緩了莖尖的萌發(fā)及成苗時間，甚至導(dǎo)致死亡。而中國櫻桃萊陽矮櫻則萌發(fā)率和成苗率均高，組培容易。

  基本培養(yǎng)基對櫻桃組培苗增殖的影響

  在F14基本培養(yǎng)基上的高砂、頑童和萊陽矮櫻，其組培苗的增殖系數(shù)分別比MS培養(yǎng)基上的高0. 84、0. 56和0. 83。在F14上培養(yǎng)的植株形態(tài)更接近于露地栽培的甜櫻桃形態(tài), 葉形正常。而在MS上的組培苗葉形不正常，葉片狹長，易出現(xiàn)玻璃化苗，有一定程度的黃化。因此，F(xiàn)14培養(yǎng)基比MS培養(yǎng)基更適合櫻桃組培苗的增殖繼代培養(yǎng)。

  基本培養(yǎng)基中添加植物生長調(diào)節(jié)劑對甜櫻桃組培苗增殖的影響

  F14培養(yǎng)基添加植物生長調(diào)節(jié)劑后，高砂和頑童組培苗的增殖系數(shù)均比單純用FI4 的大。適宜的培養(yǎng)基依次為F14+6—BA 1. 0mg / L+IBA 0. 5mg/L+GA32. 0mg / L，F(xiàn)14+6-BA 1. 0mg / LF14+6一BA 1. 0mg/L+GA32. 0mg / L，F(xiàn)14+6一BA 1. 0mg / L+IBA 0. 1mg/L。上述4種培養(yǎng)基中，高砂表現(xiàn)增殖能力均較強(qiáng)，頑童較差。

  增殖培養(yǎng)基中添加不同濃度的GA。對甜櫻桃高砂組培苗增殖的影響

  用F14+6一BA 1. 0mg / L+IBA 0. 1mg / L作為增殖培養(yǎng)基，添加不同濃度的GA,比較甜櫻桃高砂的莖尖組培增殖效果。結(jié)果表明，添加的GA,濃度由2. 0mg/L增至4. 0mg / L時，高砂組培苗的增殖系數(shù)由4. 13下降到3. 27。由此增殖培養(yǎng)基中添加2. 0mg / L GA對高砂組培苗的增殖效果很佳。試驗中發(fā)現(xiàn)，隨添加的GA濃度逐漸增大，組培苗表現(xiàn)出節(jié)問過度伸長、苗細(xì)弱、葉片形態(tài)不正常等現(xiàn)象。

  F14和MS基本培養(yǎng)基中添加IBA對櫻桃組培苗生根的影響

  由表4可以看出，F(xiàn)14和MS基本培養(yǎng)基加入不同濃度IBA對3個櫻桃品種組培苗生根的影響差別較 大，接種25天后，加入1. 0mg/L IBA的培養(yǎng)基櫻桃組培苗生根率均較高;萊陽矮櫻生根容易， 生根多，根系健壯，生根率遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過高砂和頑童，高砂的生根能力強(qiáng)于頑童。F14基本培養(yǎng)基添 加IBA 1. 0mg/L較MS基本培養(yǎng)基添加IBA 1. 0mg / L對組培苗生根效果好。

  不同甜櫻桃品種組培苗生根能力的差異

  用F14+IBA 1. Qmg/L作生根培養(yǎng)基，甜櫻桃高砂與頑童莖尖接種25天后，高砂較頑童平均生根率高，每株生根組培苗的根數(shù)多，但根長不及頑童。

  生根培養(yǎng)基中添加活性炭對甜櫻桃頑童組培苗生根的影響

  在F14+IBA 1. Qmg/L一步生根法培養(yǎng)基中，加人不同濃度的活性炭，接種甜櫻桃頑童莖尖25天 后，在F14+IBA 1. Qmg/L生根培養(yǎng)基中添加活性炭濃度為5QQ?1QQQmg / L時，甜櫻頑童的組培苗生根較好，平均生根率為60%?66. 7%,濃度過高或過低會降低生根率。